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        encapsula IMS-2011說明書

        點擊次數:25 發布時間:2019/2/22
        提 供 商: 上海起發實驗試劑有限公司 資料大小:
        圖片類型: 下載次數: 1
        資料類型: PDF 瀏覽次數: 25
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        Encapsula NanoSciences是一家專業公司,致力于為學術和工業領域的客戶和合作伙伴提供脂質體研究,開發和制造專業知識,生產脂質納米粒子,也稱為脂質體。Encapsula常規提供藥物包封脂質體的定制實驗室規模脂質體制劑,例如Clodrosome®(氯膦酸鹽脂質體),Encapsome®(用于氯膦酸鹽脂質體的純對照脂質體),Doxosome™(多柔比星脂質體),Immunosome™(用于抗體的反應性脂質體,蛋白質)結合),Immunodox™(抗體的反應性脂質體,含有多柔比星的蛋白質結合物),Immunogene™(抗體的反應性脂質體,含有遺傳物質的蛋白質結合物),Immunofluor™(抗體的反應性脂質體,包含用于追蹤的熒光分子的蛋白質綴合物),Genesome TM(脂質體DNA和RNA),Fluoroliposome TM(熒光脂質體),Atpsome TM(ATP脂質體),Cellsome TM(普通脂質體作為人工細胞模型)和Cosmesome TM(用于皮膚病學的脂質體) )對大學和工業研究實驗室的客戶。Encapsula NanoSciences近還推出了兩種口服脂質體產品系列; 適用于寵物的NanoLife Nutra和適用于人類的NanoLife Tonics。

         

        encapsula IMS-2011說明書

         

        表面活性脂質體(Immunosome®)

        有許多化學物質可用于將抗體和其他反應性分子綴合到脂質體表面。表面反應性脂質體可以與抗體的N-末端或C-末端綴合。它們可以與硫醇化抗體或Fab'片段上的游離硫綴合。

        表面活性脂質體(Immunosome®)

        Immunosome®-Folate(聚乙二醇化)

        SKU#IMS-2011

         

        2毫升600.00 美元 
        5毫升$ 1,200.00

         

        描述

        在過去的五十年中,已經使用各種類型的化學物質將諸如抗體,肽,蛋白質或其他反應性配體的分子綴合到脂質體的表面。通常,綴合可以通過N-末端,C-末端或可用的硫(例如 Fab'級分或硫醇化抗體)實現。并非所有化學物質具有相同的產率和綴合效率,并且通常再生生物相容性批次可能是一個挑戰。

        葉酸結合蛋白(FBP)是一種內源蛋白,對葉酸顯示出非常高的親和力。可以通過FBP標記抗體,并且可以通過脂質體表面上的FBP和葉酸脂質之間的非共價和高親和力相互作用形成免疫脂質體。在該方法中,已經通過硫醚鍵與FBP共價連接的抗體與葉酸衍生物脂質體綴合。具有相對低的分子量(MW~40kDa)和單一結合位點可防止脂質體交聯。

        Immunosome®-Folate是PEG化產物。對于適用于其他類型的綴合方法的其他反應性(PEG化和非PEG化產物)Immunosome®產品,

         

        配方信息

        Immunosome®-Folate(聚乙二醇化)

        脂質成分濃度(mg / ml)濃度(mM)摩爾比百分比
        15.86毫克/毫升21.55 mM100
        氫化大豆PC9.5812.2257
        膽固醇3.198.2538
        DSPE-PEG(2000)2.70.964.5
        DSPE-PEG(2000)-Folate
        0.390.120.5

         

        共軛議定書

        材料和設備

        為了將您的抗體或FBP標記的蛋白與Immunosome®-Folate脂質體結合,您需要:

        1. 建議使用實驗室渦旋混合器。
        2. 透析需要實驗室磁力攪拌器。
        3. Float-A-Lyzer®  具有適當的MWCO,可輕松從游離和非共軛蛋白質/肽/配體中清除脂質體偶聯配體。您需要確保MWCO低于1,000,000道爾頓。在1,000,000道爾頓時,透析膜上的孔徑接近100 nm,因此您的脂質體可以透析出來。你不能盲目使用透析盒。在使用旋轉柱或透析盒之前,請先了解該技術。如果您沒有使用正確的MWCO,您可能會失去整個準備工作。對于該協議,我們建議MWCO為300,000道爾頓。

        制備方法

        1. Immunosome®-Folate中的總脂質濃度為21.55 mM。脂質體中0.5%mol的脂質含有PEG-葉酸基團,并且其中僅一半暴露于脂質體的外部,其等于0.053mM的反應性可綴合脂質。對于2ml體積的脂質體,這等于1.08×10 -7 mol,對于5ml體積的脂質體,這等于2.69×10 -7mol的PEG-葉酸。 加入1:20摩爾比的用FBP標記的抗體與PEG-葉酸脂質。
        2. 我將Immunosome®-Folate與抗體-FBP在室溫下孵育1小時。
        3. 通過透析去除未綴合的抗體,蛋白質,肽或配體。我們更喜歡透析以確定排除柱的大小。透析是一個慢得多的過程,但是從非偶聯蛋白質/肽/配體中清除制劑后,免疫脂質體的損失小。旋轉柱速度非常快,但旋轉柱上的脂質體很容易丟失50%以上。我們建議使用Spectrum Labs的Float-A-Lyzer®透析盒。您需要根據蛋白質,配體,抗體或抗體片段的MW選擇具有適當MWCO的盒式磁帶。 注意:如果您決定使用透析盒,則需要確保MWCO低于1,000,000道爾頓。在1,000,000道爾頓時,透析膜上的孔徑接近100 nm,因此您的脂質體可以透析出來。您不能盲目使用透析盒和旋轉柱。它們有各種尺寸,您需要明智地選擇正確的尺寸。將免疫脂質體溶液在pH7.4的1升PBS中透析8小時。用新鮮的1升PBS更換透析緩沖液,再透析8小時。完成此步驟后,即可使用已清理過的免疫脂質體。如果您沒有使用正確的MWCO,您可能會失去整個準備工作。

        脂質體粒子計算器

        免疫體是單層脂質體,大小為100nm。脂質體的摩爾濃度為10mM。通過具有 脂質體直徑(nm)和脂質濃度(μM),可以計算一個脂質體中脂質的總數和1毫升脂質體溶液中脂質體的數量。要使用計算器,

        技術說明

        • 請記住,主要用于表面含有葉酸的脂質體用于靶向細胞上的葉酸受體。使用用FBP標記的抗體/蛋白質或配體制備免疫脂質體是非常適合的應用。
        • 由于在低pH下葉酸和FBP之間的親和力降低,免疫脂質體可在暴露于內體區室的低pH環境后通過內吞作用而內化后解體。通過允許將內化脂質體分選到合適的亞細胞區室和/或促進藥物分子從脂質體的細胞內釋放,這種內化觸發的解偶聯可能有益于在細胞水平上遞送脂質體藥物。
        • 可以使用尺寸排阻旋轉柱如Sepharose®CL-4B代替Float-A-Lyzer®透析盒。然而,在清理過程中會有非常大量的脂質體粘附在柱子上,因此我們強烈建議使用透析而不是尺寸獨特的珠子。
        • 如果您使用疏水的配體或肽,建議將其溶解在DMSO或DMF中,然后將緩沖液加入其中。建議溶液中不要使用超過5%體積的DMSO或DMF。DMF和DMSO均與脂質體相容,并且它們也可與水混溶。其他有機溶劑如乙醇和氯方與脂質體不相容并會導致脂質體溶解。如果您終使用DMSO或DMF,那么在完成綴合反應后,您需要從脂質體中去除DMSO和DMF。為此,您需要使用由REGENERATED CELLULOSE MEMBRANE制成的透析盒。注意:并非所有膜都與DMF和DMSO兼容。我們建議使用Slide-A-Lyzer™MINI透析裝置MWCO為2K,由ThermoFisher生產的再生纖維素膜制成。除去DMSO或DMF后,您可以使用Float-A-Lyzer®透析裝置進行清潔制劑的后步驟。
        • 脂質體應保持在4°C,切勿冷凍。

         

         

        出現

        Immunosome®-Folate是一種由納米尺寸單層脂質體制成的白色半透明液體。通常由于脂質體的小尺寸,在小瓶的底部不會發生沉降。將脂質體包裝在琥珀色小瓶中。 

        訂購/運輸信息

        • 所有基于脂質體的制劑在隔熱包裝中使用隔夜運輸或國際快遞運輸在4°C的藍色冰上運輸。
        • 脂質體不應該被冷凍。在脂質膜中形成的結晶冰可破壞膜,改變脂質體的大小并導致包封的藥物泄漏。液體形式的脂質體應始終保存在冰箱中。
        • 從美利堅合眾國境外訂購的客戶負責其政府進口稅和海關文書工作。Encapsula NanoSciences不對美國以外國家的進口費負責。
        • 我們強烈鼓勵日本,韓國,臺灣和中國的客戶通過經銷商訂購。如果直接通過我們訂購,這些國家的嚴格通關規定將導致這些易腐配方的定制清關延遲。經銷商可以輕松清關海關包裹。要查看經銷商列表,請單擊此處。
        • 從澳大利亞的大學和研究機構訂購的客戶應該記住,脂質體配方是由合成材料制成的,配方不需要“允許進口檢疫材料”。脂質體不是生物制品。
        • 如果您希望您的學院的FedEx或DHL帳戶收取運費,請在訂購時提供帳號。
        • Encapsula NanoSciences無法控制因惡劣天氣或清關延誤造成的延誤。確認訂單后,您將收到FedEx或DHL跟蹤號碼。提前聯系FedEx或DHL,確保海關的文書工作按時完成。

        儲存和保質期

        存儲

        Immunosome®產品應始終在4°C??的黑暗中儲存,除非在動物給藥前短時間內置于室溫。不要凍結。如果懸浮液被冷凍,則包封的藥物可以從脂質體中釋放,從而限制其有效性。此外,脂質體的大小也會在冷凍和解凍時發生變化。

        保質期

        Immunosome®-Folate每天制作。裝運的批次是在同一天生產的。建議在生產日期后4個月內使用產品。

         

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