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        Pfu DNA 聚合酶

         
        Pfu DNA 聚合酶
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        公司名称:
        上海起发实验试剂有限公司
        产品报价:
        100
        发布日期:
        2017/7/4 8:36:59
        所 在 地:
        上海
        已获点击:
        1819
          【详细说明】

        目录号 规格 备注 价格 说明书下载
        E002-01A 250U 含dNTP 230元
        E002-01B A包装×5 含dNTP 1035元
        E002-02A 250U 不含dNTP  180元
        E002-02B A包装×5 不含dNTP  810元
         
        · Pfu DNA 聚合酶内容 (250 U)

        Pfu DNA聚合酶(5 U/μl) 50 μl
        dNTP 混合液 (各10 mM) 250 μl
        10 × Pfu Buffer with Mg2+ 1 ml

         

        · Pfu DNA 聚合酶说明
        本酶为Pyrococcus furiosus中分离的pfu DNA pol 基因在大肠?#21496;?#20013;进行表达后经多次纯化分离而得。Pfu DNA聚合酶具有3’-5’外切酶(校正)活性,当聚合反应发生碱基错配时,聚合酶的校正活性可将错配的碱基切除。Pfu DNA聚合酶为使用范围zui广的高保真DNA聚合酶,其错误?#24335;?#20026;1.3x10-6,推荐Pfu DNA聚合酶用于需高保真的PCR反应。

        · 用途
        用于要求保真度比?#32454;?#30340;PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等(参见 Sinobio 实验方案)。

        · 产品特点
        高保真:Pfu DNA聚合酶是使用zui广泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的10倍。
        灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段(图例一)。
        快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟?#32431;?#23436;成反应体系配置。
        便利:10μl, 25μl 或50μl体系全部适用。

        · 质量保证
        经多次柱纯化,SDS-PAGE检测纯度大于95%;
        PCR方法检测无大肠?#21496;鶧NA残留,无核酸内、外切酶污染。

        · 使用建议

        Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为?#20132;?#26411;端,无3’端"A"突出,其PCR产物?#30446;?#38534;有两种方案。
        1. PCR前引物进行5’端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于?#20132;?#26411;?#35828;?#36733;体中(参见 Sinobio实验方案)。
        2. 将产物3’末端加A后再与T-Vector连接(参见 Sinobio 实验方案)。
        3. 由于Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部?#32440;?#35299;。因此在设计引物时应?#23454;?#22686;加引物的长度,理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配置反应体系,并zui后加入Pfu酶。

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        · 其他说明

         
         
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