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        邮编:201203
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        xpressbio XPEH0852

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        产品型号:
        2'-5'-寡腺苷酸合成酶
        产品报价:
        产品特点:
        xpressbio XPEH0852说明书

        Human OAS1 (2'-5'-oligoadenylate synthase 1) ELISA Kit

        人OAS1(2'-5'-寡腺苷酸合成酶1)ELISA试剂盒
        目录号:XPEH0852
        尺寸:48t/ 96t
        反应性:人
        范围:1.56-100ng/ml
        灵敏度:<0.938ng/ml
        应用:用于血清、血浆、组织匀浆等中OAS1的定量检测
          2'-5'-寡腺苷酸合成酶xpressbio XPEH0852的详细资料:

        xpressbio XPEH0852说明书

        Human OAS1 (2'-5'-oligoadenylate synthase 1) ELISA Kit

        人OAS1(2'-5'-寡腺苷酸合成酶1)ELISA试剂盒

        目录号:XPEH0852
        尺寸:48t/ 96t
        反应性:人
        范围:1.56-100ng/ml
        灵敏度:<0.938ng/ml
        应用:用于血清、血浆、组织匀浆等中OAS1的定量检测
        生物流体。
        储存:4°C,6个月
        注:仅供研究使用。
        xpressbio XPEH0852成?#33258;?#20214;

         

        化验原理
        本试剂盒基于三明治酶联免疫吸附测定技术。将抗OAS1抗体预涂于96孔板上。生物素结合抗OAS1抗体
        用作检测抗体。标准品、试样及生物素?#26597;?#26816;测添加和未结合的结合物用洗涤缓冲?#21512;?#28068;掉。TMB基板
        用于观察HRP酶促反应。TMB被HRP催化产生蓝色。
        添加酸性停止溶液后变为黄色的产品。黄色的密度是
        与盘中采集的OAS1样本量成比例。读取O.D.吸光度
        在微板阅读器中450纳米,然后可?#32422;?#31639;出OAS1的浓度。
        使用注意事项
        1。检验实验操作的有效性和样品稀释的适宜性
        比例、中试使用标准和少量样品
        推荐。
        2。打开后和使?#20204;埃?#20445;持板干燥。
        三。在使?#37238;錳准?#20043;前,旋转管并将所有部件降到管底部。
        4。储存TMB试剂时要避光。
        5。洗涤过程非常重要,不充分洗涤容?#33258;?#25104;假阳性。
        6。建议对标准测试和样品测试进行重复试井。
        7。不要让微量板在?#27835;?#26102;干燥,因为干板会使活性成?#36136;?#27963;。
        板。
        8。不要重?#35789;?#29992;尖端和管子以避免交叉污染。
        9。避免同时使用不同批次的试剂。
        所需但未提供的材料
        1。微板阅读器(波长:450纳米)
        2。37°C培养箱
        三。自动洗板机
        4。精密单通道和多通道移液管及一次性针头
        5。清洁管和eppendorf管
        6。去离子水或蒸馏水
        手洗
        在不接触侧壁的情况下丢弃板中的溶液。把?#22871;优?#25171;在吸收剂上
        滤?#20132;?#20854;他吸收性材料。用350ul洗涤缓冲?#21644;?#20840;填充?#38752;?#20117;,并
        浸泡1至2分钟,然后?#20248;套?#20013;吸取内容物,然后将?#22871;优?#25171;在吸收剂上。
        滤?#20132;?#20854;他吸收性材料。再重复此步骤两次,总共
        三洗。

         

        自动清洗
        抽干所有井,然后用350ul洗涤缓冲液清洗三次。最后一次清洗后,
        将板倒置,并将板拍打在吸收性滤?#20132;?#20854;他吸收性材料上。它是
        建议将垫圈设置为浸泡1分钟。
        样品收集和储存
        收集后立即隔离试样,然后立即?#27835;觶?小时内)。或
        等分并长期保存在-20°C。避免多次冻融循环。
        血清:允许样品在室温下凝块2小?#34987;?#22312;4℃前过夜。
        以大约1000×g的速度离心20分钟。收集上清液并携带
        马上化验出来。采血管应是一次性的、非致热的,并且
        非内毒素。
        血浆:用EDTA-NA2作为抗凝剂收集血浆。离心样品15个
        在收集后30分钟内,在2-8°C下在1000×g条件下保?#22336;?#38047;。收集上清液
        立即进行化验。避免溶血,高胆固醇样品。
        组织匀浆:?#35805;?#24773;况下,溶血性血液可能会影响结果,因此
        应该用冰冷的PBS(0.01m,ph=7.4)冲洗组织,以清除多余的血液。
        彻底地。纸巾应称重,然后切碎成小块。
        在PBS中均匀化(体积取决于组织的重量。9毫升PBS
        适用于1克组织块。建议加入一些蛋白酶抑制剂
        在冰上放一个玻璃均质器。为了进一步破坏细胞,你可以用超声波
        悬浮液用超声波细胞破坏或使其经受冻融循环。这个
        然后匀浆以5000×g的速度离心5分钟,得到上清液。
        细胞培养上清?#28023;?#31163;心上清液20分钟,去除不溶性杂质
        在2-8°C的温度下,在1000×g的温度下收集细胞碎片。收集干净的上清液并进行?#27835;觥?br />立即。
        其他生物液体:在2-8°C下以1000×g的速度离心样品20分钟。收集
        上清?#28023;?#31435;即进行化验。
        样品制备:样品应清晰透明,离心去除。
        悬浮固体。
        注:5天内使用的样品可在4°C下储存,否则必须储存样品。
        在-20°C(≤1个月)或-80°C(≤2个月)下,以避免生物活性和污染的损失。
        溶血样品不适用于本试验。
        样品稀释指南
        最终用户应首先估计试验样品中目标蛋白的浓度,以及
        选择?#23454;?#30340;稀释因子,使稀释后的目标蛋白浓度降到最宜。
        ?#20934;?#30340;检测范围。用提供的稀释缓冲?#21512;?#37322;样品,并进行?#22797;?#35797;验
        在实践中可能是必要的。试样必须与稀释缓冲液充分混合。和
        在实验前,还应制作标准曲线和样品。

         

        高目标蛋白浓度(1000-10000ng/ml)?#21512;?#37322;度:1:100。(即加入1μl
        样品放入99μl样品/标准稀释缓冲液中。)
        培养基靶蛋白浓度(100-1000ng/ml)?#21512;∈停?:10(即加入10μl
        样品放入90μl样品/标准稀释缓冲液中。)
        低靶蛋白浓度(1.56-100ng/ml)?#21512;∈停?:2(即加入50μl样品)
        放入50μl样品/标准稀释缓冲液中。)
        目标蛋白浓度极?#20572;?le;1.56ng/ml):不需要稀?#20572;?#25110;1:2稀释。
        试剂制备与贮存
        使?#20204;?#23558;所有试剂置于室温。
        1,Wash Buffer:
        用去离子或蒸馏法将30毫升浓缩洗涤?#21512;?#37322;至750毫升洗涤液中。
        水。将?#35789;?#29992;的溶液放回4°C。如果浓缩液中形成晶体,可?#32422;?#28909;。
        与40°C水浴(加热温度不应超过50°C)混合,轻轻搅拌至
        晶体完全溶解了。溶液应冷却至室温,然后
        使用。
        2、标准:
        1)。100ng/ml标准溶?#28023;?#23558;1 ml样品/标准稀释缓冲液加入其中
        标准管,保?#36136;?#28201;10分钟,并充分混合。
        2)。50ng/ml→1.56ng/ml标准溶?#28023;?#29992;50ng/ml、25ng/ml标记6个eppendorf管,
        分别为12.5ng/ml、6.25ng/ml、3.125ng/ml、1.56ng/ml。?#22336;?.3毫升样品/
        标准稀释缓冲液进入每个试管。将0.3ml上述100ng/ml标准溶液加入
        第1管并彻底混合。将0.3毫升从第一管转移?#38477;?#20108;管,并彻底混合。
        将0.3ml从第二管转移?#38477;?#19977;管,并彻底混合,?#26469;?#31867;推。
        注:标准溶液最宜在2小时内使用。标准溶液应为
        4°C,最多12小时。或在-20°C下储存48小时。避免反复的冻融循环。
        3、生物素检测抗体工作液的制备
        实验前1小时内准?#28014;?br />1)计算工作液总体积:0.1 ml/井×井数。(允许)
        比总体积多0.1-0.2毫升)
        2)用抗体稀释液1:100稀释生物素检测抗体,混合
        彻底地。(即在99μl抗体稀释液中加入1μl生物素检测抗体。)

         

        4、法制备?#22791;?#36807;氧化物酶标记链霉亲和素的?#26597;睿⊿ABC)工作的解决方案:
        准备在30min,之前的实验。
        1)calculate总卷在工作的解决方案:0.1毫升/(×)井的数量。(allow
        0.1~0.2毫升以上的总卷)
        2)的稀释SABC用SABC稀释缓冲AT 1∶100和thoroughly混音。(即增加1μL,SABC法检测
        激情99μL,SABC法检测稀释缓冲)。
        检测程序
        在增的井,equilibrate SABC法对工作液和底物TMB方法至少30
        在最小的房间的温度(37°C)。当diluting样品和reagents,他们必须是混合
        完全和evenly。。。。。。。这是推荐的标准曲线图A for each试验。
        1。的标?#25216;?#27979;试样本和控制(零)井的预涂板分别为,和
        然后,记录他们的位置。这是推荐的测量的标准和样品中的每
        重复的。洗板2时代前的综合标准,抽样和控制(零)井!!!!!!!
        2。aliquot 0.1ml(100ng/ml,50ng/ml,25ng /毫升,12.5ng /毫升,6.25ng /毫升,3.125ng /毫升,1.56ng /毫升,
        标准溶液的入井的标准。
        3。添加0.1毫升/标准样品的稀释缓冲的激情控制(零)的话。
        4。添加0.1毫升恰当稀疏抽样(人体血清、血浆、组织匀浆和其他
        生物流体的热情。)抽样试验井。
        5。。。。。。。该密封板与A和incubate覆盖在37°C为90分钟。
        6。remove的封面上,必须在内容和板,洗板和2与华盛顿时报的缓冲。
        不要让井干式化外,在任何时间。
        7。添加0.1毫升的生物素标记的检测抗体工作液入井(以上的标准,
        试验样品与零井)。添加的溶?#28023;?#22312;底部每井无接触加热的
        侧壁。
        8。该密封板与A和incubate覆盖在37°C(60分钟。
        9。remove的封面,和洗板3时代与洗的缓冲。
        10。添加0.1毫升,SABC法检测溶液工作热情,?#38752;祝?#22312;盖板和incubate在37°C的方法
        30分钟。
        11。remove的覆盖和洗板5与华盛顿时报的缓冲,和每一次让洗
        缓冲停留在井的方法1~2分钟。
        12。添加90μL(TMB底物的热情,?#38752;祝?#22312;盖板和incubate 37°C,在黑暗的.
        在15到30分钟。(注:这incubation时参考使用的方法是?#27426;?#30340;,优化的时
        应该由用户端的决心。)和shades蓝可以在第一个3~4口井
        (与最集中的标准溶液中OAS1),其他井秀好obvious色彩。
        13。。。。。。。添加50μL大学停止溶液的热情和thoroughly每好的混合。激情黄色颜色的变化
        立即。
        14。读《absorbance外径在450 nm的微孔板读者立即后的增
        停止的溶液。

         

        注:如果测量的样品被稀?#20572;?#23558;稀释系数乘以浓度。
        从插值得到稀释前的浓度。
        总结
        1。在添加标准、样品和控制(零)井之前,清洗2次平板!
        2。在37°C下向每个孔中添加100μl标准或样品90分钟。
        三。在37°C下?#38752;准?#20837;100μL生物素检测抗体工作液60分钟。
        4。吸洗3次
        5。?#38752;?#20117;加入100μL SABC工作液。在37°C下培养30分钟
        6。吸洗5次
        7。添加90μl TMB基板。在37°C下培养15-30分钟
        8。加入50μl停止溶液。立即在450牛米处读取
        9。计算结果
        典型数据和标准曲线
        OAS1酶联免疫吸附测定试剂盒的典型标准运行结果如下所示。这个标准曲线是
        在实验室生成,仅供演示。每个用户都应该获得自己的标准
        按实验曲线。(不适用)

         

         

         

         

        特异性
        该方法灵敏度高,对OAS1的检测有很好的特异性。未观察到OAS1与类似物之间存在明显的交叉反应或干扰。
        注:受现有技能和知识的限制,我们无法完成OAS1与所有类似物之间的交叉反应检测,因此交叉反应可能?#21248;?#23384;在。
        恢复
        下面列出的基质中加入?#27426;?#27700;平的OAS1,回?#31456;?#20026;
        通过将测量?#28068;?#26679;品中预期的OAS1量进行比较计算。

         

        线性度
        通过加入?#23454;?#27987;度的
        OA1及其系列稀释剂。通过计算的百分比来证明结果。
        集中到预期

         

        精密度
        ?#27835;?#20869;精密度(?#27835;?#20869;精密度):低、中、高3个样品
        分别在一个平板上测试OAS1 20次。
        ?#27835;?#38388;精密度(?#27835;?#38388;精密度):低、中、高3个样品
        在3个不同的平板上测试OAS1,每个平板上重复8次。
        cv(%)=sd/平均x100
        内?#27835;觶篶v<8%
        化验间:CV<10%
        稳定性
        酶联免疫吸附测定试剂盒的稳定性取决于活性损失率。这个工具的损耗率比?#31995;?br />在?#23454;?#30340;储存条件下,在有效期内不得超过10%。

         

         

        为?#21496;?#37327;减少对性能、操作程序和实验室条件的额外影响,
        尤其要严格控制室温、空气湿度、培养箱温度。
        也强烈建议由同一个操作员从
        从开始到结束。

        产品相关关键字: xpressbio xpressbio代理 XPEH0852 xpressbio XPEH0852 2'-5'-寡腺苷酸合成酶
         如果你对2'-5'-寡腺苷酸合成酶xpressbio XPEH0852?#34892;?#36259;,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

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